En ændring af en spektrofotometrisk eller safranin densitometri følsom analyse til ... - abstrakt - Europe PMC




For nylig, en test til kvantificering af glucosaminoglycaner blev rapporteret baseret på udfældning med safranin O (Lammi, M. og Tammi, M. (1988) Anal. Biochem. 168, 352-357). I denne procedure, er bundfaldet, der dannes, når glycosaminoglycan eller proteoglycan blandes med Safranin O opsamlet med en dot-blot apparat af et membranfilter. Farveintensiteten i punkterne måles densitometrisk og er proportional med mængden af ​​glycosaminoglycaner og proteoglycaner i prøven. Denne rapport beskriver en ændring af densitometrisk safranin O salvie, der tillader dets anvendelse som en spektrofotometrisk assay. Til dette, er præcipitaterne solubiliseres i cetylpyridiniumchlorid og absorbansen bestemmes for de resulterende opløsninger. Som med densitometrisk metode, guanidiniumchlorid formindsker intensiteten af ​​farven. Men farven er stabil, selv efter solubilisering i mindst en uge. Indsamlet op til 10 mikrogram materiale bundfald kan solubiliseres i 100 mikroliter frisk cetylpyridiniumchlorid, således at der kan opnås en højere følsomhed, hvis bundfaldet solubiliseret måles i en mikrokuvetten. , Solubilisering med cetylpyridiniumchlorid tillader således anvendelsen af ​​testen safranin O til glycosaminoglycaner og proteoglycaner selv når et densitometer er ikke tilgængelig.


Efterlad en kommentar