Novaultra Safranin eller farvning kit




"Forrige Næste"
  • print
Sider: [ 1 ] stå af

forfatter Emne: Kit NovaUltra safranin O Stain (4748 gange)

0 Medlemmer og 1 Gæst læser dette emne.

NKouris
  • Newbie
  • Indlæg: 3
NovaUltra safranin O Stain Kit " ovenfor: November 5, 2012, 02:53:42 » Jeg købte safranin O Stain Kit (http://www.ihcworld.com/catalog/p4159/NovaUltra-Safranin-O-Stain-Kit/product_info.html), og kontrol kurser og chondrogene prøver. Jeg havde mine prøver fikseret i 4% PFA, dehydreret og indlejret i paraffin, efterfulgt af dissekere og derefter farvning protokol ifølge protokollen tilvejebragt med kittet (Weigert jern- hæmatoxylin i 10 minutter, Fast Green i 5 minutter, eddikesyre for 10sek, og safranin O i 5 min). Alle prøver "positivt" farves, der har en rød farve uden grøn / krikand baggrund farvning.

prøver Jeg havde samme parti tidligere farvet med en 3. part professionel og kontrol var lyse blå / grønne vand og chondrogene prøver var rød (som forventet).

Jeg forsøger at løse årsagen til alle prøver er røde, da jeg kom på tværs prøverne med dette kit og protokol. Har inkubationstid på 5 min safranin O behov for at blive reduceret for at undgå dette overstaining falske positiver?



logget NovaUltra safranin O Stain Kit " ovenfor: November 5, 2012, 02:53:42 » Gula
  • Global moderator
  • Goldmember
  • Indlæg: 356
Re: NovaUltra safranin O Stain Kit " # 1 svaret: November 6, 2012, 13:48:05 » Der var en anden skylletrin efter Safanin O? Du kan prøve at vaske i 1% eddikesyre efter, at udvide det til Safranin O sweapt ud af uønskede områder. Hvis eddikesyre ikke fører til succes, forlænge skylning i 96% ethanol. En af disse bør føre til en differentiering af farvning.
Gula logget NKouris
  • Newbie
  • Indlæg: 3
Re: NovaUltra safranin O Stain Kit " # 2 svaret: November 7, 2012, 08:39:14 » Tak for de råd Gula. Jeg har været i kontakt med Richard og meddelte mig, at jeg var ved hjælp af gamle protokol, i denne rækkefølge:
jernhematoxylin
røre H20
hurtigt Verde
eddikesyre
dH2O
Safranin O

Nu brugte jeg protokollen til dato på dit websted med denne rækkefølge:
jernhematoxylin
berøring H2O
Safranin O
dH2O
hurtigt Verde
eddikesyre

Det har været med til at reducere den overvældende rød plet i alle prøver, men der er lidt eller ingen blå / grøn plet baggrund. Dette gælder selv med en reduktion af Safranin O i 2min, og en stigning i dehydrering af 95% EtOH i 5 min. For at få baggrunden vibrerende pletten skal mere tid zappe Verde> 10min?

jeg sendte til Richard billeder til at illustrere problemet. Enhver yderligere hjælp er meget værdsat. logget Gula
  • Global moderator
  • Goldmember
  • Indlæg: 356
Re: NovaUltra safranin O Stain Kit " # 3 Svaret: November 7, 2012, 13:51:02 » Hej,
er blot en IHC bruger rundt omkring i verden og har intet ansvar :).
orden nu, i denne samtale. Skyl efter hurtigt grønt bør minimeres i eddikesyre og fortyndes ethanoler. Måske langvarig skylning efter safranin O og hurtigt grønt først, gør lysplet.
held og lykke
Gula logget NKouris
  • Newbie
  • Indlæg: 3
Re: NovaUltra safranin O Stain Kit " # 4 svaret: November 8, 2012, 13:17:29 » Citat fra: Gula 7 november 2012, 01:51:02 Hej,
er blot en IHC bruger rundt omkring i verden og har intet ansvar :).
orden nu, i denne samtale. Skyl efter hurtigt grønt bør minimeres i eddikesyre og fortyndes ethanoler. Måske langvarig skylning efter safranin O og hurtigt grønt først, gør lysplet.
held og lykke
Gula

Åh, jeg ser. Så jeg virkelig sætter pris på din feedback! Jeg har øget jern hæmatoxylin og fast green trin med 2 gange i 20 minutter, og reducerede eddikesyre fra halvt trin til 5sek og nu diskret jeg blå baggrundsfarvning. Ikke så levende, som jeg har set fra andre, men der er. Dette har reduceret Safranin O farvning så godt, så jeg kan forsøge at stige hurtigere end 30 minutter Green til at blive mere levende og øge safranin 2 til 3 minutter at genvinde en smule "af den røde plet. Tak for al den hjælp, sporet her! logget Gula
  • Global moderator
  • Goldmember
  • Indlæg: 356
Re: NovaUltra safranin O Stain Kit " # 5 svaret: November 9, 2012, 01:38:02 » Andre trichrome pletter fungere bedre efter re-fiksering med Bouin, fordi formaldehyd er normalt blokerer en del af de farvestoffer funktionelle grupper, der er nødvendige.
Dette er for at inkubere Bouin glider i 60 min i 60 ° C, vask derefter med rindende vand indtil klarhed. Så komme videre med farvning.
der kan være nyttige.
Gula logget Re: NovaUltra safranin O Stain Kit " # 5 svaret: November 9, 2012, 01:38:02 »
  • print
Sider: [ 1 ] gå på "Forrige Næste"
  • »
  • Produkter og udstyr diskussion »
  • Histologi Produkter (Redaktører: Excalibur, ImmunoNYC) »
  • NovaUltra safranin O Stain Kit



Efterlad en kommentar