Særlig plet i histopatolog




Særlig plet i histopatolog
  • 1. Særlig plet i histopatologPræsenteret af Dr. Mahesh Guide: Dr. S. P. Hiryur - Lektor
  • 2. • specielle farver bruges til at identificere visse normale og unormal stof, der findes i celler og væv, som ikke kan identificeres på proceduren Haematoxylene når en stor farvestof Molekylstørrelse er i stand til at trænge ind, vil være altid gør det på de mindste udgifter molekyle.
  • 43. Masson trichome plet • Denne metode bruges til påvisning af kollagen fibre i væv, såsom hud, mave, tarm og lunge. • De kollagen fibre er farvet blå og deres kerner vil blive farves sort.
  • 44. Masson trichrom plet princip: Som for navnet anvendes 3 farvestoffer, muskel selektivt farves, kollagenfibre, fibrin og erythrocytter. Som en generel regel, i trichrom plette mindre porøse væv farves af små farvemolekyle. Syre fuchsin plet omkring bindevæv, PMA (phosphormolybdæn Syren) konkurrerer med fuchsin og adgang Collagen flytter fuchsin. Hvis reaktion stoppet på det rette tidspunkt, vil kollagen Gratis at blive farvet af methyl blåt.
  • 45. • Reaent brugt - jern Hematoxylinopløsning Weigerts - Phosphomolybdic- phosphorwolfram opløsning af syre - Biebrich scarlet fucshin syreopløsning - Anilin Blå Solution - Eddikesyreopløsning 1% • Resultat - Nuclei: Sort Collagen: Blå Cytoplasma, Muscle, RBC: Rød • Positiv kontrol: Hud, lunger, mave, tarme
  • 46. Pocedure: Masson trikrom pletten • afvoksning sektion og bringe vand • Vask i ledningsvand • Stain med hematoxylene weigerts jern i 10 minutter • Vask godt i rindende vand i 10 minutter • Vask i destilleret vand • Stain i Biebrich scarlet syre fuchsin i 10-15 minutter • Vask i destilleret vand. • Differentiere i phosphormolybdæn-phosphowolframsyre opløsning i 10-15 minutter • Overfør § direkte (uden skylning) anilin blå opløsning og pletter i 5-10 minutter
  • 47. • skylles kortvarigt i destilleret vand og differentiere in1% eddikesyreopløsning i 2-5 minutter • Vask i destilleret vand • Dehydrer gennem alkohol, xylen og mount DPX.
  • 48. resultat kollagen Blå Cytoplasmaet RBCs- Red • membranoproliferativ glomerulonefritis på Masson trichome plet
  • 49. Anvendelser af Masson trikrom plet • Det bruges til at skelne mellem kollagen og glat muskel i cancer. • At identificere øget kollagen deposition betingelser såsom cirrhose, keloider, godartet prostatahyperplasi, glomerulonephritis membranoproliferativ etc.
  • 50. Van Gieson STAIN princip Når du bruger en kombineret løsning af picrinsyre og syre fuchsin, små pikrinsyre molekyler trænger alle vævet hurtigt, men det er kun holdes fast i tæt tekstur røde blodlegemer og muskel. De større molekyler af Ponceau S fortrænger molekyle af picrinsyre fra kollagen fibre, som har større porer og tillade større molekyler til indtaste. Det anvendes til påvisning af kollagen. Resultat - rød til lyserød eosinofile granuler, Kerner - Blå
  • 66. PROCEDURE: (Congo rød plet) 1. afparaffiniser og hydrat i vand. 2. Farv i Congo rød opløsning for5 minutter. 3. Differentier med alkoholisk kaliumhydroxid Opløsning til 3-10 sekunder. 4. Vask i vand, bejdse kerner alun hematoxyllin, differentiere og blå. 7. tørrer, xylen og mount.
  • 67. Det bruges til at påvise amyloidaflejringer • Nedsat amyloidosis- i dialysepatienter lang • Medulary skjoldbruskkirtlen karcinom, • karvæggen i tilfælde af Alzheimers sygdom • hjertearytmier, osv
  • 68. Positive røde farve er til stede omkring den store centrale arterie og et mindre fartøj til højre. Højre panel viser grønt dobbeltbrydning som er diagnostisk af amyloid, når den røde Congo bush betragtes med polariseret lys. Alle amyloid har en fibrillær ultrastruktur, der giver denne reaktion.
  • 69. Krystal / methyl violet til amyloid • krystalviolet eller methyl violet plet er vant til metakromatisk farvning amyloid. • de pletten amyloid som en lilla-rød i den blå baggrund. De anvendte reagenser • / methyl violet krystal • Alkohol 95% • 1% vandig ammoniumoxalat • eddikesyre 0,2%
  • 70. Fremstilling af opløsninger • Opløs 2 g krystalviolet / methyl i 20 ml 95% alkohol og 80 ml 1% vandig ammoniumoxalat knuses med minimal varme. Cool og filter
  • 71. procedure • Indstil sektion vandstanden. • Stain i lilla løsning / methyl krystal i 5 minutter. • Vask og differentiere i eddikesyre 0,2% Styring differentiering mikroskopisk arrestere differentiering i vand og gentage indtil en god kontrast opnås mellem amyloid og baggrund. • Vask og monteret i DPX. RESULTAT Amyloid - Viola Backgrond - Blå
  • 72. Amylod - lilla Baggrund - blå
  • 73. anden del
  • 74. Pletter af lipider - Oil Red O - Sudan Black B
  • 75. Olie eller rød plet PRINCIP: Farvningen med olieopløselige farvestoffer henvises til forøget opløselighed af farvestoffet i lipid- stoffer i den sædvanlige vand-alkohol farvestof opløsningsmidler. resultat Lipid - Rød nukleinsyre Blå
  • 76. • Reagenser: • 60% isopropanol • Alum hæmatoxylin: • Gelatine Glycerin monteringsmidler arbejder løsning • Oil Red O: eller at gøre stamopløsning af olie rød O • Olie rød O - 0,5 g • Isopropylalkohol 100 ml Opløs farvestoffet i isopropanol, ved hjælp af den mest blid varme af vandbad. Dette er stamopløsningen. eller at foretage en arbejdsopløsning af olie rød O • Fortynd 30 ml lager pletten med 20 ml destilleret vand og lad stå i 10 minutter, stamme i Coplin krukke og dække immedeiately. • Arbejdsgruppen opløsning skal lavet frisk hver gang.
  • 77. PROCEDURE: (O rød plet Oil) • Korrektion slides i 10% formalin, hvis frisk. • Vask i rindende vand i 1-10 minutter at dræne off det overskydende vand. • Skyl med 60% isopropanol. • Farvelægning med brugsopløsning olie frisklavet O rød i 15 minutter. • Skyl med 60% isopropanol. • kerner let krat med alun hæmatoxylin 5 dyk. • Skyl med destilleret vand. • Montering med vandigt montering medium, glycerin gelé.
  • 78. emboli visum fedt som røde prik inde kapillærerne i lungerne i rød olie O plet
  • 79. Leversteatose -stain Oil red O
  • 80. anvendelser • O rød løbeild anvendes til neutral farve triglycerider, lipider og lipoproteiner. • De tumorer afledt af fedtceller (liposarkomer) kan være adskiller sig fra andre typer af tumorer. • fedt, der forekommer i en unormal sted, såsom fedtstoffer emboli, der kan udvikle sig efter et knoglebrud eller eller en skade, der knuser et fedt kroppen. • fra lipid opbevaring sygdomme som Nieman-Pick sygdom • At demonstrere fedt eller lipider i fedt som conidition leveren. • I hæmatologiske tilstande, såsom Burkitts lymfom og histiocytisk syndrom blå hav
  • 81. FAT - SUDAN SORT B ​​- Propylenglycol PRINCIP: Sudan Black B er et farvestof, der er uopløselig i vand, men Det opløses i fedt. Derfor vil denne farvestof ophobes i fedt blodceller inde i cellerne. • Det er svagt basisk farvestof og kombinere med syre grupper i forbindelser lipider, phospholipider farvelægning så også. resultat FAT Blå / Sort nukleinsyre Rød
  • 82. reagenser: • 85% propylenglycol: Propylenglycol -85,0 ml -15,0 Ml destilleret vand • hæmatoxylin: • Sudan Black / propylen: Sudan Black -0,7 gm Propylenglycol -100,0 ml
  • 83. PROCEDURE: (sort plet Sudan) 1. Korrektion glider i 10% formalin, hvis frisk. 2. Vask i hanevand, vask med destilleret vand, afløb det overskydende vand. 3. Propylenglycol, to ændringer, 5 minutter hver. 4. Farv i Sudan Black, 7 minutter, rør. 5. Dip i 85% propylenglycol, 3 minutter. 6 Skyl med destilleret vand. 7. Stain med nukleare rød, 3 minutter. 8. Vask i vand. 9. Vask i hanevand, vask i destilleret vand. 10. Montering med vandig montering, glycerin gelé.
  • 84. anvendelser • Sudan black anvendes til neutral farve triglycerider, lipider, lipoproteiner og phospholipider. • I hæmatologisk lidelse kan det anvendes til differentiere eksplosion ligesom krat Myeloblasttypen, men lymfoblastær ikke pletter.
  • 85. Myeloblaster om Sudan sort plet
  • 86. MASSON FONTANA metode-FOR Melanin Melanin er et ikke-lipid, ikke-hematogene pigment. Det er en nuværende pigment brun-sort normalt i håret, hud, nethinde, iris og visse dele af CNS. PRINCIP:  Den melanin er uopløselig i organiske opløsningsmidler, men opløseligt i 1 M hydrooxide natrium.  Det er langsomt bleget af stærke oxidationsmidler.  De ammoniaksølvnitrat løsninger reduceres Melanin sort metallisk sølv er grundlaget for Masson Fountain fremgangsmåde til demostrating melanin.
  • 87. BRUG: • Identificere melanin og argentaffin granulater. • Diagnosen malignt melanom • Argentaffin granuler findes carcinoid tumorer.
  • 88. Melaninpigment i huden viser RESULTATER: Melanin, argentaffin granulat - Sort -Red kerner
  • 89. Melaninpigment i maligne celler melanom, Fontana-Masson pletten.
  • 90. Von Kossa FODBOLD METODE PRINCIP: Vævssnittene behandles med sølvnitrat opløsning, er sølv aflejret ved at erstatte fodbold og derefter reduceres fra stærkt lys og vises som metallisk sølv. BRUG: unormale kalkaflejringer kan findes i enhver område af kroppen. Med H & E pletten, fodbold se blå-lilla dybder. Af von Kossa metode synes sort.
  • 91. viser koronar forkalket aterosklerotisk plaque RESULTATER: calciumsalte -Black -Red kerner cytoplasma -Pink
  • 92. PERL'S- REAKTION PÅ preussisk blå IRON PRINCIP: Fortyndet mineralsyre hydrolyse af ferri Press jern fra vævsaflejringer bundet til proteiner, som tilstedeværelsen af ​​ferrocyanid ioner, udfældes som stærkt farvet og yderst vandopløseligt kompleks, kalium jern blå preussiske ferrocyanide-. • ferroioner ikke producerer en farvereaktion. • vævsaflejringer indeholdende ferrijern er uvægerligt hæmosiderin
  • 93. BRUG: • At demonstrere ferri jern i vævssnit. • Små mængder af jern findes normalt milt og knoglemarv. • For store mængder er hemochromatosis- med indskud lever og bugspytkirtel, og med hemosiderosis- indskud i leveren knudepunkter, milt og lymfeknuder. • For at få adgang knoglemarven jernindhold
  • 94. reagenser: • 2% af kaliumferrocyanid: Kaliumferrocyanid - 2,0 g destilleret vand - 100,0 ml • Neutral-hurtig Rød: NR - 1GM destilleret vand - 100 ml iseddike - 1 ml • 2% af saltsyre: . Conc Saltsyre, - 2,0 ml destilleret vand - 100,0 ml KONTROL: Postmortem lunge - højt antal hjerte de celler, der indeholder den manglende hæmosiderin
  • 95. PROCEDURE: (Blå Perl Preussen) 1. afparaffiniser og hydrat til destilleret vand. 2. pletten med en blanding af lige volumen af ​​2% vandig opløsning kaliumferrocyanid og 2% af HCI-opløsning i 30 minutter. 3. grundig vask med destilleret vand. 4. Tæller pletten med 0,5% neutral rød smule. 5. Vask i hanevand. 6. tørrer, klar og mount.
  • 96. Hæmosiderin i leveren RESULTATER: Jern (hæmosiderin) -blå -Red kerner Baggrund - pink
  • 97. Farvning for mikroorganismer - Ziehl Neelsen (ZN) plet - Wade Fite Faraco plet - Gomori Methenamin (hexamin) sølvplet - Macchia Warthin-Starry - Stain Giemsa - Gram-farvning
  • 98. Ziehl-Neelsen (ZN) for Mycobacterium Stain bacillus Mycobacteria er vanskelige at bevise med Teknisk Gram fordi de besidder en kapsel indeholdende en langkædet fedtsyrer, der gør Hydrofob dem. phenoliske syre eller varme kan anvendes til at reducere overfladespænding og øge porøsiteten.
  • 99. • PRINCIP Mycobacterias (tuberkelbakterier) har et lipid-rige celle væg, der er i stand til at påtage sig nuancer stærk phenol opløsninger (f.eks. karbol opløsning), således at farvestof opretholdes til næste differentiering syre eller alkohol. Det siges, at både syre og alkohol hurtig (AAFB = syre og alkohol baciller). resultater • mykobakterier - Rød • Baggrund - Pale Blå
  • 100. metode • Indstil sektion vandstanden. • §§ oversvømmelse Carbol-fuchsin og varme til dampning ved at føre ånden i pad dias flamme på metal rack op, den eneste træning damp. • Vask glider i destilleret vand. Ryst overskydende væske. • affarvning objektglas med 20% H2SO4 • Vask i hanevand, indtil der ikke mere røde løber overfladen, når glideren er nedsænket i vand • Vask grundigt med vand.
  • 101. • tæller plet opløsning af methylenblåt, 30 sekunder. • Blot og skelne fra dehydrering alternativ og rehydrering, indtil baggrunden er en bleg delikat Blå. • Undersøg high-drevne mikroskop screening og bekræfter hele organismen med en formodet olie nedsænkning mål.
  • 102. Mycobacteria ses som røde bjælker
  • 103. sticks resistente over set på Btarmbiops
  • 104. Wade Fite Faraco • Denne stedet bruges til farvning baciller i leprocy vævsprøve. • Leprocy baciller er langt mindre syre og alkohol hurtigt af tuberkelbakterier. Så alkoholen er fjernet fra fugtende og dehydratiserende trin og 10% svovlsyre anvendes som en whitener sted af syren-alkohol-opløsning. • Afsnittet kan også findes ved hjælp af jorden deparaffinised valnød olie og blandingen af ​​xylen beskytte mere delikat voksagtig lag lepra baciller.
  • 105. PROCEDURE • Afsnit Varm og deparaffinised hjælp blanding af to dele xylen og en del af jordnøddeolie i 10 minutter. • tørre og vaske i afsnittet vand, indtil det er jævnt våd. • Stain Carbol fuschin i 20-30 minutter. • Vask under rindende vand og dup tør. • Blegning i svovlsyre ved 10%, indtil der ikke mere rød vises mens nedsænkning i vand. • Vask i ledningsvand og tæller pletten med 0,2% methylen blå i 5-10 sekunder. • Blot tør og ikke passer. • udstrygninger skal ses i immersionsolie linse.
  • 106. Leprrocy og anden rød mycobacteria- blå baggrunden-
  • 107. Warthin-Starry fremgangsmåde til spirokæter (Warthin Starry & 1920) PRINCIP Organismer demonstreres af sølv imprægneringsteknikken. løsninger acetatpuffer. pH 3,6 natriumacetat 4,1 g Eddikesyre 6,25 ml destilleret vand 500 ml 1% af sølvnitrat i pH 3,6 acetatpuffer.
  • 108. • Den kan også bruges til at demonstrere - Helicobacter pylori i den gastriske mucosa - Krop Leptospira i nyre biosy - Cat scratch sygdom forbundet baciller på node biops
  • 109. H. pylori på maveslimhinden af ​​Warthin Starry plet
  • 110. Leptospira nyrebiopsi organ
  • 111. resultat: Organismer - Sort Baggrund - guld gul bacilli Cat scratch disease lymfeknudebiops
  • 112. Gomori Methenamin sølvfarvning for champignon • GMS-farvning er et sølvfarvning teknik til demonstrerer svampe i vævssnit. • Det er primært baseret på farvning af polysaccharider i fungale cellevægge, og det kan esseree anvendes til at demonstrere basalmembranen.  PRINCIP Denne metode afhænger af reduktionen af sølv fra aldehydgrupper produceret efter oxidation af de fungale vægkomponenter med kromsyre syre.
  • 113. pneumocystis cariniresultat: Svamp, Pneumocystis carinii, Melanin - sort Mucin og glycogen- - Grå-sort røde blodlegemer - yellow Baggrund - lysegrøn
  • 114. GMS pletten for Cryptococcus neoformans
  • 115. basalmembran af GMS plet
  • 116. Giemsa • PRINCIP Denne metode er en modificeret version af den oprindelige Giemsa teknik, der anvendes til hæmatologiske udstrygninger og giver gode resultater for sektioner. Giemsa er en Romanowsky- plet indeholder azurblå B og eosin Y og er i stand til at gøre subtil forskel nuancer af farve. De sure grupper nukleinsyrer og proteiner af cellekernen bestemme deres absorption af blåt farvestof og base B tilstedeværelsen af ​​basiske grupper involverer en affinitet syrer og deres farve til eosin farvestoffer.
  • 117. • Kan anvendes til histopatologisk diagnose af malaria og nogle andre spirochæt protozo, og blod parasitter. resultater • Micro-organisme, svamp - lilla-blå parasitter • nukleinsyre blå til lilla • Pink laks Erythrocytes- • cytoplasma - blå • Den kollagen, muskler og knogler - lyserød
  • 118. Aspergillus fumigatus på Giemsa
  • 119. Toxoplasma gondi
  • 120. Gram Fremgangsmåde til bakterier • Gram-farvning til at differentiere bakterierne i 2 klasser afhængig af deres struktur og sammensætning af cellevæggen • grampositive og gramnegative. • PRINCIP Krystalvioletfarvning nukleinsyrerne af bakterier (og stof baggrund) og efter behandling med iod, den sektioner er differentieret i acetone og kontrast baseret magenta. Stoffet baggrund og Gram negativ mister deres blå farve og derefter farvet med tælleren pletten baseret magenta. Grampositive bakterier er resistente over for misfarvning og opretholde den violette / blå farve iodkrystal.
  • 121. resultat: Gram-positive mikroorganismer - blå Gram - negative organismer - Rød.
  • 122. gram positive gramnegative
  • 123. Kutan anthrax - Gram-positive bakterier blå farvet hud biops
  • 124. referencer • Rosai og Ackerman s Kirurgisk pathology- 10. udgave • Textbook of microbiology- Ananthanarayan og Paniker af • Internet
  • 125. tak


Efterlad en kommentar